簡(jiǎn)要描述:Alexa Fluor 405 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(藍(lán)色)是從一種菌類Amanita Dhalloides所提取出來的環(huán)肽。它與F-actin競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合。熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽在納克水平就可與F-actin選擇性的結(jié)合并且易溶于水,為檢測(cè)組織切片,培養(yǎng)細(xì)胞和無細(xì)胞體系中的actin的定位和定量提供了非常方便的標(biāo)記方法。
產(chǎn)品分類
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品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
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分子式 | / | 純度 | / |
分子量 | / | 貨號(hào) | AC18L012 |
規(guī)格 | 300 T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 為檢測(cè)組織切片,培養(yǎng)細(xì)胞等提供了非常方便的標(biāo)記方法。 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
鬼筆環(huán)肽是從一種菌類Amanita Dhalloides所提取出來的環(huán)肽。它與F-actin競(jìng)爭(zhēng)性的結(jié)合。熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽在納克水平就可與F-actin選擇性的結(jié)合并且易溶于水,為檢測(cè)組織切片,培養(yǎng)細(xì)胞和無細(xì)胞體系中的actin的定位和定量提供了非常方便的標(biāo)記方法。
本產(chǎn)品與Sigma P5282等產(chǎn)品相比更具優(yōu)勢(shì)、替代性,詳情見下文或咨詢銷售人員。
本產(chǎn)品為Alexa Fluor 405 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽(藍(lán)色),可發(fā)出高亮度、穩(wěn)定的藍(lán)色熒光,染色反應(yīng)特異性強(qiáng),對(duì)比性高,適合用作F-actin的定性和定量檢測(cè)。與Actin抗體比較,Alexa Fluor405鬼筆環(huán)肽具有如下優(yōu)點(diǎn):(1)與actin亞單位一比一結(jié)合,并且不與G-actin結(jié)合,具有比Actin抗體更好的染色效果。(2)且本品的結(jié)合沒有物種差異性,適用性廣泛。(3)鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的非特異性信號(hào)可忽略,因而圖像的反差較好。(4)染色與用于細(xì)胞分析的其他熒光染色*兼容,包括熒光蛋白、Qdot® 納米晶體和其他Alexa Fluor偶聯(lián)物(包含Alexa Fluor偶聯(lián)二抗)。(5)經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。
技術(shù)資料
1. Ex(nm):400
2. Em(nm):421
3. 分子量:約1400
4. 溶劑:DMSO
5. 結(jié)構(gòu)式:
訂購信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
Alexa Fluor 405 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽 (藍(lán)色) | AC18L012 | 300 T | 2280 |
保存方法
冰袋運(yùn)輸,收到貨后可按需分裝,并于-20℃避光干燥保存,避免反復(fù)凍融。1年有效。
使用方法
1. 準(zhǔn)備1× Alexa Fluor405標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液
吸取1 μL 1000×Alexa Fluor405標(biāo)記鬼筆環(huán)肽存儲(chǔ)液到1 mL含有1%BSA的PBS緩沖液中即可得到1×工作液。
【注】:不同的細(xì)胞染色后情況不同,相應(yīng)Alexa Fluor405鬼筆環(huán)肽使用量也需根據(jù)不同情況而定。
2. 細(xì)胞染色步驟
(1)細(xì)胞培養(yǎng)過夜或更長(zhǎng),使其密度達(dá)到50~60%匯合度。
(2)吸掉培養(yǎng)液,37℃預(yù)熱的1×PBS(pH 7.4)清洗細(xì)胞2次。
(3)使用含有3~4%甲醛的PBS溶液進(jìn)行細(xì)胞固定,室溫固定10-30min。
【注】:避免固定劑中含有甲醇成分,因?yàn)榧状荚诠潭ㄟ^程中可能破壞肌動(dòng)蛋白。
(4)室溫條件下,用PBS清洗固定好的細(xì)胞2~3次,每次10 min。
(5)(可選):室溫條件下,用溶于PBS的0.1% Triton X-100溶液透化處理3~5 min,從而增加其通透性。
【注】:鬼筆環(huán)肽的分子量小,很容易通過細(xì)胞,一般情況下不需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行冷丙tong和TRITON X-100處理。
(6)室溫條件下,用PBS清洗細(xì)胞2~3次,每次10 min。
(7)每孔加入 Alexa Fluor405標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液100 μL/孔(96孔板),室溫避光染色20~90 min,夏季時(shí)間相對(duì)短些。
(8)用PBS清洗細(xì)胞3次,每次5 min,去除掉多余的Alexa Fluor405標(biāo)記鬼筆環(huán)肽。
(9)(可選):加入足量的即用型DAPI溶液對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染,如:100 μL/孔(96孔板),室溫3~5 min。用PBS清洗細(xì)胞2次,每次5 min。
(10)于熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察,選擇Alexa Fluor405激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=400/421 nm)和/或DAPI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454 nm)。
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